USP<788>美國藥典中對於(yú)注射劑中的顆粒物檢測(cè)規範

本總章與歐洲藥典和/或日本藥典的相應文本一緻。這些藥典已承諾不對本協調章節進行任何單(dān)方面修改。本通用章節文本中屬於(yú)國家USP文本的部分，因此不屬於(yú)協調(diào)文本的一部分，用符号标記(◆◆) 具體說明這一事實。

注射劑(jì)和非注射劑(jì)中的顆粒物由溶液中意外存在的外來可移動(dòng)未溶解顆粒（氣泡除外）組成。

◆如章節<1> Injections and Implanted Drug Products中所述，通過(guò)肌肉或皮下途徑給(gěi)藥的注射溶液必須滿足<788> Particulate Matter in Injections章節要求。這一要求已無限期推遲用於(yú)獸醫的産(chǎn)品。包裝和标記的專門用於(yú)腸外沖洗溶液不受<788>的顆(kē)粒物質要求的限制。放射性藥品制劑(jì)不受<788> Particulate Matter in Injections章節的限制
。凡标簽規定的在用藥前使用最終過濾器的非腸(cháng)道産(chǎn)品，均可不受<788> Particulate Matter in Injections的限制
，前提是有科學數(shù)據(jù)證明這一豁免是合理的。◆

對於(yú)顆粒物的測定，下文規定瞭(le)兩種方法，即方法1（光阻法顆(kē)粒計(jì)數試驗）和方法2（顯微顆粒計數試驗）。當(dāng)檢查注射劑和腸(cháng)外輸液中是否存在亞可見顆粒時，最好使用方法1。然而，可能有必要通過(guò)光阻法顆粒計數試驗和顯微顆粒計數試驗來測(cè)試某些制劑，以得出符合要求的結論。

並(bìng)非所有的腸(cháng)外制劑都能通過上述一種或兩種方法檢查亞可見顆粒。例如，如果制劑的透明度降低或粘度增加，方法1不适用時(shí)，則應根據(jù)方法2進行試驗。乳劑、膠體和脂質體制劑就是例子。類似地，當被吸入傳感器時産(chǎn)生空氣或氣泡的産(chǎn)品也可能需要進行顯微顆粒計數測(cè)試。如果待測(cè)制劑的粘度足夠高，以緻無法通過任何一種試驗方法對其進行檢查，必要時需要使用适當的稀釋劑進行定量稀釋
，以降低粘度，以便進行分析。

在檢查顆粒物的單個單元或單元組時獲得的結果不能確(què)定地外推到其他未經測試的單元
。因此，如果要從觀測數據中得出有效的推論
，以表征大量單元中顆粒物的水平，就必須制定統計上合理的採(cǎi)樣計劃。

◆就本章而言，小容量腸(cháng)外注射劑是小容量注射劑的同義詞(cí)，大容量腸(cháng)外注射劑是大容量注射劑的同義詞(cí)。◆

光阻法顆粒計數測試

根據光阻原理，使用合适的儀器，根據大小自動(dòng)確(què)定顆粒大小和顆粒數量
。Reagents, Indicators, and Solutions—Reagent Specifications章節(jié)中提供瞭(le)無顆粒水的定義。

使用已知尺寸在10 µm到25 µm之間(jiān)的球形顆粒的分散體校準儀器。這些标準顆粒分散在無顆粒水中。分散過(guò)程中必須注意避免顆粒聚集。◆系統适用性可通過使用USP顆粒計數RS進行驗證。◆

一般預防措施

試驗在限制顆粒物的條件下進行，最好在層(céng)流櫃(guì)中進行。

使用溫熱的清潔劑溶液仔細清洗所用的玻璃器皿和過濾設備(bèi)（膜式過濾器除外），並(bìng)用大量水沖洗，以去除所有清潔劑痕迹。使用前，用無顆粒水從上到下、從外到内沖洗設備(bèi)。

注意不要将氣泡引入待檢查的制劑中，尤其是在将制劑的部分轉移到要進行測定的容器中這個過程中。爲瞭(le)檢查環境是否适合試驗，玻璃器皿是否正確(què)清潔，所用的水是否無顆粒，應進行以下試驗。根據下述方法，測定五個無顆粒水樣品中的顆粒物，每個樣品5 mL。如果10 µm或更大粒徑的顆粒數量超過25個，則爲試驗採(cǎi)取的預防措施是不夠的。必須重複準備(bèi)步驟，直到環境、玻璃器皿和水适合試驗。

方法

通過連續20次緩慢翻轉容器，混合樣品内容物。如有必要，小心地拆下密封蓋
。使用無顆粒水射流清潔容器開口的外表面，並(bìng)拆下封蓋，避免内容物受到任何污染。通過适當(dāng)的措施消除氣泡，例如靜置2分鍾或超聲波處理。

對於(yú)大容量腸外注射劑，需要測(cè)試單個單元。對於(yú)體積小於(yú)25 mL的小容量腸(cháng)外注射劑(jì)，将10個或更多單(dān)位的内容物合並(bìng)到一個清潔的容器中，以獲得25 mL的體積；可通過混合适當(dāng)數量小瓶的内容物，並(bìng)用無顆粒水稀釋至25 mL，或在無顆粒水不适用時，用适當(dāng)的無顆粒溶劑(jì)稀釋至25 mL，制備(bèi)試驗溶液。體積(jī)爲25 mL或以上的小容量非腸(cháng)道藥物可單(dān)獨進行試驗。

非腸(cháng)道使用的粉末用無顆粒水配置
，或當(dāng)無顆粒水不适用時
，用适當(dāng)的無顆粒溶劑重新配制
。

◆對於(yú)标有“不用於(yú)直接輸注"的散裝包裝的非腸(cháng)道用藥，當體積爲25 mL或以上時，按照小容量非腸(cháng)道用藥的說明進行。計算與标簽中給出的最大劑量相當(dāng)的部分的試驗結果。例如，如果散裝包裝的總體積爲100 mL，最大劑量體積爲10 mL，則(zé)每毫升的平均粒子數(shù)将乘以10，以獲得基於10 mL最大劑量的測試結果。[注意
，計算測(cè)試結果時，考慮這個最大劑量部分相當於(yú)一個完整容器的内容。]

應根據容器容積的不同，按照大容量或小容量腸外制劑的指示，制備和測試包裝有雙隔室（用於(yú)容納藥品和溶劑）的産品。按照标簽對每個單元進行混合，活化和攪拌以確(què)保單獨成分和藥物溶解*混合。◆

試樣數量必須足以提供統計上合理的評估。對於(yú)大容量腸(cháng)外注射或體積大於(yú)等於(yú)25 mL的小容量腸外注射，可使用适當的取樣計劃，測(cè)試少於(yú)10個單位的樣品。

取四份樣品，每份5 mL，並計算尺寸等於或大於10 µm和25 µm的顆粒數。忽略第一份的結果，並(bìng)計算待檢查制劑(jì)的平均顆粒數。

評估

對於在标稱體積超過100 mL的容器中提供的制劑(jì)，採(cǎi)用試驗1.A的标準。

對於在标稱體積小於100 mL的容器中提供的制劑(jì)，採(cǎi)用試驗1.B的标準。

對於在标稱體積爲100 mL的容器中提供的制劑(jì)，採(cǎi)用試驗1.B的标準。

[注：日本藥典中使用瞭(le)試(shì)驗1.A。]

如果平均顆粒數超過限值，則通過顯微顆粒計數測(cè)試對(duì)制劑進行測(cè)試。

試驗1.A

标稱含量超過 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大於(yú)等於(yú)10 µm的粒子的平均顆粒數不超過 25個/mL，尺寸大於等於25 µm的粒子的平均顆粒數不超過 25個/mL，則該(gāi)制劑符合測(cè)試要求。

試驗1.B

标稱含量小於 100 mL 的容器的腸(cháng)胃外輸注溶液或注射溶液：如果每個容器中存在的尺寸大於(yú)等於(yú)10 µm的粒子的平均顆粒數不超過 6000 個，尺寸大於等於25 µm的粒子的平均顆粒數不超過600個
，則該(gāi)制劑符合測(cè)試要求。

顯微計數法

使用合适的雙目顯微鏡、用於(yú)保留顆粒物的過(guò)濾器組件和用於(yú)檢查的薄膜過(guò)濾器。

将顯微鏡調整爲100±10倍，並(bìng)配備一個用物鏡測微計校準的目鏡測微計、一個能夠容納並(bìng)穿過薄膜過濾器整個過濾區域的機械工作台，以及兩個合适的照明器，以提供除瞭(le)傾斜照明之外的外場照明。

目鏡測(cè)微計是一個(gè)直徑爲圓形的分劃器（見圖1），由一個(gè)被十字準線(xiàn)分成四個(gè)象限的大圓、100倍放大時直徑爲10 µm和25 µm的透明和黑色參考圓以及以10 µm增量刻度的線性刻度組成。使用經過國内或國際标準機構認證的測(cè)微計對(duì)其進行校準。分劃的線性刻度的相對(duì)誤差在±2%以内是可以接受的。大圓被定義爲網格視場（GFOV）。

圖1。圓直徑分劃(huà)。被十字準線分成四個(gè)象限的大圓被定義爲網格視場（GFOV）。提供瞭直徑爲10µm和25µm的透明和黑色圓圈，作爲粒度測(cè)定的對(duì)比标尺。

需要兩個照明器。一個是顯微鏡内部的一個主光場(chǎng)照明器，另一個是一個外部的、可聚焦的輔助照明器，可以調(diào)節以提供10°–20°角度的反射斜照明。

用於(yú)保留顆粒物的過濾器組件包括由玻璃或其他合适材料制成的過濾器支架，並(bìng)配備有真空源和合适的膜過濾器。

膜過(guò)濾器尺寸合适，顔色爲黑色或深灰色，無網格或有網格，标稱(chēng)孔徑爲1.0 µm或更細。

一般預防措施

試驗在限制顆粒物的條件下進行，最好在層(céng)流櫃(guì)中進行。

使用溫熱的清潔劑溶液非常小心地清洗所用的玻璃器皿和過濾器組件（膜式過濾器除外），並(bìng)用大量水沖洗，以去除所有清潔劑痕迹。使用前，用無顆粒水從上到下、從外到内沖洗膜過濾器和設備(bèi)的兩側。

爲瞭(le)檢查環境是否适合試驗，玻璃器皿和膜過濾器是否正確(què)清潔，所用的水是否無顆粒，應進行以下試驗。根據下述方法測定50 mL無顆(kē)粒水裏的顆(kē)粒物。如果過(guò)濾區域内存在20個以上粒徑爲10 µm或更大的顆粒，或5個以上粒徑爲25µm或更大的顆粒，則試驗所採(cǎi)取的預防措施是不夠的。必須重複準備(bèi)步驟，直到環境、玻璃器皿、膜過濾器和水适合試驗。

方法

通過将容器連續緩慢翻轉20次來混合樣品内容物。如有必要，小心地拆下密封蓋(gài)。使用無顆粒水射流清潔容器開口的外表面，並(bìng)拆下封蓋(gài)，避免内容物受到任何污染。

對於(yú)大容量腸外注射劑，需要測(cè)試單個單元。對於(yú)體積小於(yú)25 mL的小容量腸外注射，将10個或更多單(dān)位的内容物組合在一個清潔的容器中；可通過混合适當數量小瓶的内容物，並(bìng)用無顆粒水稀釋至25 mL，或在無顆粒水不适用時，用适當(dāng)的無顆粒溶劑(jì)稀釋至25 mL，制備試驗溶液。體積爲25 mL或以上的小容量非腸(cháng)道藥物可單(dān)獨進行試驗。

非腸(cháng)道使用的粉末用無顆粒水配置，或當(dāng)無顆粒水不适用時，用适當(dāng)的無顆粒溶劑重新配制。

試樣數量必須足以提供統計上合理的評估。對於(yú)大容量腸(cháng)外注射或體積大於(yú)等於(yú)25 mL的小容量腸外注射劑，可使用适當的取樣計劃，測(cè)試少於(yú)10個單位的樣品。

用幾毫升無顆粒水濕潤裝有薄膜過濾器的過濾器支架内部。将溶液池或單個樣品的所有溶液轉移到過濾漏鬥中，並(bìng)施加真空。如果需要，逐步添加一部分溶液，直到整個體積被過濾。最後一次添加溶液後，使用無顆粒水射流開始沖洗過濾器支架的内壁。保持真空，直到膜過濾器表面沒有液體。将膜式過濾器放在有蓋培養皿中，讓過濾膜風幹，蓋子稍微半開。過濾膜幹燥後，将皮氏培養皿放在顯微鏡台上，在照明設備的反射光下掃描過濾膜，並(bìng)計算尺寸等於(yú)或大於(yú)10 µm的顆粒數量和等於或大於25 µm的顆粒數量。或者，允許通過(guò)計算部分過(guò)濾膜的計數來確(què)定整體過(guò)濾膜的計數。計算待檢查制劑的平均顆粒數。

採(cǎi)用圓形直徑網格進行粒徑測定的過程是通過估算顆粒的等效直徑，並(bìng)與網格上的10 µm和25 µm參考圓進行比較。因此，粒子不會從網格視場内的初始位置移動，也不會疊加在參考圓上進行比較。透明分劃參考圓的内徑用於(yú)確(què)定白色和透明粒子的大小，而黑色粒子的大小則使用黑色不透明分劃參考圓的外徑。

在進行微觀顆粒計數試驗時，不要試圖測量或列舉無定形、半液體或其他形态不明顯的材料，這些材料在過濾膜上會出現污漬或變(biàn)色。這些材料表面很少或沒有起伏，呈現膠狀或薄膜狀外觀。在這種情況下，可通過光阻法計數方法測試溶液樣品來幫(bāng)助解釋計數。

評估

對於在标稱體積大於100 mL的容器中提供的制劑(jì)，應採(cǎi)用試驗2.A的标準。對於(yú)在标稱(chēng)體積小於(yú)100 mL的容器中提供的制劑(jì)，採(cǎi)用試驗2.B的标準。對於标稱體積爲100 mL的容器中提供的制劑(jì)，採(cǎi)用試驗2.B的标準。

[注：日本藥典中使用瞭(le)試(shì)驗2.A]

試驗2.A

标稱含量超過 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大於(yú)等於(yú)10 µm的粒子的平均顆粒數不超過 12個/mL，尺寸大於等於25 µm的粒子的平均顆粒數不超過2個/mL，則該制劑符合測試要求。

試驗2.B

标稱含量超過 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大於(yú)等於(yú)10 µm的粒子的平均顆粒數不超過 3000個，尺寸大於等於25 µm的粒子的平均顆粒數不超過300個，則該(gāi)制劑符合測(cè)試要求。

解決方案：

上海胤煌科技爲注射劑中的不溶性微粒檢測(cè)提出瞭(le)以下産品：

1、 YH-LEIP-0201光阻法不溶性微粒分析儀

LEIP系列不溶性微粒檢測儀滿足各國藥典中光阻法檢測不溶性微粒的儀器要求，可直接檢測注射液、無菌粉、輸液器具及藥包材的不溶性微粒含量及大小。儀器採(cǎi)用高性能進口激光光源及補償電路，保證各種無色、有色樣品的測試精確(què)度。進樣狹縫及管路採(cǎi)用進口316L及進口PTFE材料，可直接檢測(cè)有機(jī)溶劑、油基質等特殊溶液。

2、YH-MIP-0103顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀

技術優勢：

√全自動的測(cè)試系統，自動掃描、計數、出具報(bào)告，減少人爲操作的誤差

√全自動(dòng)檢測(cè)系統，減少在使用過程中對測(cè)試人員眼睛的傷害

√可以區分顆粒性質，鑒(jiàn)别不溶性微粒的來源，是金屬還(hái)是纖維

√符合中國藥典、美國藥典、歐洲藥典、日本藥典等各國藥典對(duì)於(yú)不溶性微粒檢查的要求。

3、YH-MIP-0205 Pro全自動顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀

YH-MIP-0205 Pro全自動顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀是全新一代的不溶性微粒分析儀，能夠以全自動的方式實現樣品中的不溶性微粒檢測，可以完成自動過濾、幹燥、測(cè)試、出具報(bào)告等多項流程；超分辨算法、AI智能算法等多種圖像處理方式的引入，能有效確(què)保測(cè)試數據的準確(què)性。符合中國藥典、美國藥典、歐洲藥典及日本藥典等各國藥典不溶性微粒檢查的儀器要求。